پلی آدنیلاسیون(Poly Adenylation) Poly(A) Polymerase

به افزودن نوکلئوتید آدنین که به صورت AMP آدنوزین مونو فسفات به سر 3′ رشته انجام میشود پلی آدنیلاسیون گفته شده که توسط آنزیم پلی آ پلیمراز انجام می‌شود. این آنزیم AMP را از سوبسترای ATP برداشت کرده کرده که این واکنش به صورت زنجیره ای انجام شده و به انتهای رشته بسته به زمان انجام واکنش 20-200 باز A اضافه میکند

این واکنش در سلول های یوکاریوتی، به صورت افزودن دم پلی A به انتهای رشته mRNA انجام میشود که پس از سیگنال Polyadenylation که با توالی AAUAAA بر روی رشته mRNA نابالغ وجود دارد شروع شده و پس از انجام عملیات برش و افزودن باز A به رشته، دم پلی A به رشته mRNA اضافه میشود

نقش دم Poly(A)در mRNA

• دم پلی a با افزایش طول RNA باعث محافظت از اگزونوکئاز هایی شده که از انتهای 3’، تجزیه رشته را شروع میکنند، در نتیجه با افزایش بیشتر طول دم پلی آ، پایداری و طول عمر رشته mRNA افزایش پیدا می‌کند
• با اتصال دم پلی A به پروتئین Poly(A)-binding protein (PABP)، موجب انتقال mRNA از هسته به سیتوزول سلول می‌شود
• همچنین Poly(A)-binding protein (PABP) متصل به mRNA، با پروتئین های آغازگر ترجمه، کمپلکس تشکیل داده که این امر موجب جذب سریعتر ریبوزوم، افزایش سرعت شروع ترجمه و همچنین امکان تکرار ترجمه از همان رشته RNA و ریبوزوم میشود
• کنترل کیفیت بیان ژن: mRNA های ناقص و یا با دم کوتاه، ترجمه نشده و سریعتر تجزیه و حذف می‌شوند
• تنظیم بیان ژن: با افزایش و کاهش طول دم POLY A، میزان بیان از تعداد ثابت mRNA تغییر پیدا کرده که این امر در تنظیم بیان ژن در مراحل مختلف سلولی از رشتهmRNA می‌شود

نقش Poly (A) Polymerase در پروکاریوت ها

نقش این آنزیم در پروکاریوت ها، تقریبا عکس یوکاریوت ها است به صورتی که با افزودن این دم به رشته RNA، سیگنال برش توسط اگزونوکلئاز ها ایجاد شده و آن رشته سریعا تجزیه میشود

کاربرد Poly A Polymerase

یکی از کاربرد ها، در تحقیقات بررسی میزان بیان microRNA جهت افزایش طول رشته miRNA استفاده میشود

در واکنش Real Time PCR جهت تکثیر قطعه هدف، یک جفت پرایمر به دو سر قطعه متصل میشوند، طول قطعه هدف باید به اندازه ای باشد که دو پرایمر 18-24 نوکلئوتیدی به دو سر آن متصل شوند; اما رشته microRNA با طول تقریبی 18.-25 نوکلئوتیدی، جایی برای اتصال یک جفت پرایمر ندارند

برای رفع این مسئله، ابتدا توسط کیت و آنزیم Poly (A) Polymerase، به رشته microRNA دم پلی A اضافه شده، سپس در مرحله سنتز cDNA، با اتصال پرایمر بلند طراحی شده(RT adaptor) که حاوی بخش هایی جهت اتصال به Poly A tail و بخشی جهت اتصال پرایمر ریورس میاشد، هم طول قطعه افزایش پیدا کرده هم جایگاهی برای اتصال پرایمر دوم ایجاد میشود( پرایمر فوروارد به مکمل رشته microRNA متصل میشود، پرایمر ریورس به بخشی از پرایمر RT adaptor )

کیت Poly (A) Polymerase تولید شرکت دانش بنیان راتین ژن

شرکت دانش بنیان راتین ژن، با انجام فرایند های تولید و تحقیق و توسعه فراوان، برای اولین بار در ایران، موفق به تولید کیتی با پایداری و فعالیت هم تراز با برند های معتبر خارجی شده که نیاز مراکز تحقیقاتی متعددی در کشور با برطرف کرده است (عرضه شده با برند Technogene)

جهت مشاهده اطلاعات محصول، کلیک کنید

جهت کسب اطلاعات بیشتر میتوانید از طریق راه های ارتباطی موجود در سایت با ما در تماس باشید