کیت استخراج DNA از باکتری‌های گرم منفی

کیت استخراج DNA از باکتری‌های گرم منفی یکی از کیت های کاربردی در استخراج ماده ژنومیک باکتری از انواع نمونه ای کشت میکروبی و بیولوژیک از جمله ادرار، بزاق، خلط، مایع CSF و… می‌باشد که با مقاصد متعدد تحقیقاتی و تشخیصی مورد استفاده قرار می‌گیرد

ویژگی کیت استخراج DNA از باکتری گرم منفی شرکت دانش بنیان راتین ژن برند Technogene

با بهره‌گیری همزمان نانوذره پوشش دار سیلیس و ستون سیلیکا پس از تحقیق و توسعه فراوان شرکت دانش بنیان راتین ژن، امکان بهره‌وری از مزیت هر دو روش نانوذرات با توان جذب DNA بالا و روش ستون سیلیکا با سرعت عمل و راحتی بالا، امکان تخلیص کمترین لودهای میکروبی و DNA  را به صورت سریع و خالص فراهم می‌آورد

مزیت تلفیق نانوذره سیلیس با ستون سیلیکا

در روش ستونی به علت ظرفیت پایین عامل های اتصالی به DNA در ستون های موجود در بازار و همچنین سرعت بالای عبور لیزات از فیلتر، بخش زیادی از اسیدنوکلئیک از فیلتر رد شده و فرصت اتصال پیدا نمی‌کند به همین دلیل استفاده از  نانوذرات به لیزات قبل از انتقال به ستون، فرصت کافی برای اتصال تمامی قطعات DNA فراهم آمده که با فرمولاسیون بهینه محلول های لیز کننده و شستشو دهنده امکان اتصال همزمان DNA به نانوذره سیلیس و ستون سیلیکا میصر شده در نتیجه حساست کیت نسبت که کیت های موجود دیگر افزایش یافته  و پایین ترین مقادیر DNA از نمونه استخراج می‌شود

عدم نیاز به انکوباسیون های آنزیمی

باکتری گرم منفی به علت ساختار پوششی خود، نیاز به لیز آنزیمی نداشته در نتیجه استخراج از این نوع باکتری با محلول لیز حاوی دترجنت های یونی و غیر یونی ساده و بدون نیاز به انکوباسیون بلند مدت، تمام فرایند استخراج در زمان 10-15 دقیقه انجام می‌شود

فرایند استخراج DNA از باکتری گرم منفی

با استفاده از لواپ یا لوپ مقداری از سطح کشت باکتری را برداشته و در 100 میکرولیتر بافر PBS، TE و یا آب مقطر حل کرده تا یک محلول یکدست بدست آید و برای سایر نمونه های بیولوژیک که ماهیت مایع داشته نیازی به این مرحله نیست

با افزودن محلول لیز کننده، سلول لیز شده و سپس با افزون نانوذره به لیزات و هم زذن، DNA به نانوذرات متصل میشود و سپس مخلوط حاصل به ستون سیلیکا منتقل شده و ادامه فرایند مشابه روش های استخراج ستونی مرسوم انجام می‌شود

در این روش بخش زیادی از DNA به نانوذرات متصل شده و پس از سانتریفیوژ، نانوذره متصل به DNA در سطح فیلتر ستون باقی مانده و بخش کم DNA متصل نشده توسط فیلتر به دام می افتد در نتیجه بالای 99 درصد ماده ژنومیک استخراج خواهد شد

ویژگی‌های کلیدی کیت استخراج DNA برند Technogene

• طراحی نوآورانه: استفاده همزمان از نانوذرات آهن-سیلیس و ستون سیلیکا برای افزایش بازده و کیفیت DNA

• استخراج DNA خالص: بدون مهارکننده آنزیمی، مناسب برای واکنش‌های PCR، تعیین توالی و هیبریدیزاسیون مانند Southern blotting

• فرمولاسیون ویژه محلول لیز: حذف نیاز به انکوباسیون طولانی و مراحل آنزیمی پیچیده و امکان اتصال همزمان DNA به ستون سیلیکا و نانوذره سیلیس

• مناسب برای انواع نمونه‌ها: کشت میکروب و نمونه‌های بیولوژیک متنوع

کاربردها

• استخراج DNA از باکتری‌های گرم منفی در نمونه‌های آزمایشگاهی

• آماده‌سازی نمونه برای PCR، RT-PCR و تعیین توالی DNA

• تحلیل ساختار ژنتیکی و توالی‌یابی باکتری‌ها

• استفاده در تست‌های هیبریدیزاسیون و Southern blotting

• تحقیقات میکروبیولوژی و بیوتکنولوژی