Description
شرکت راتین ژن با فرمولاسیونی بهینه، محلول RNA Extraction با نام تجاری RGzol را برای محققین محترم به تولید رسانده است.
ترایزول چیست؟
ترایزول محلولی تک فازی حاوی نمک گوانیدیوم ایزوتیوسیانات، فنل و… می باشد که در فرایند بیوتکنولوژی استخراج RNA از انواع نمونه های خون و سایر بافت و سلول های انسانی، گیاهی، قارچ، باکتری، ویروس و…مورد استفاده قرار میگیرد.
در این محلول نمک اسیدی گوانیدیوم باعث لیز دیواره سلولی، دناتوره کردن پروتئین ها، مهار آنزیم نوکلئاز(RNase) شده و باعث حفظ ریبونوکلوئیک اسید (RNA) می شود و در pH اسیدی باعث جدا شدن RNA در فاز محلول رویی از DNAدر فاز رسوبی زیرین می شود که در فرایند سانتریفیوژ در حضور کلروفرم، DNA، پروتئین و سایر اجزا از جمله فنول رسوب کرده و در فاز زیرین قرار می گیرند و RNA در فاز رویی قرار میگیرد و با جدا کردن فاز رویی، در مرحله بعدی توسط الکل(ایزوپروپانول ویا اتانول) RNA رسوب کرده در نهایت پس از شستشو و حل شدن در آب DEPC treated محصولی خالص بدست می آید
RNA در تست های متنوعی از جمله بررسی بیان ژن، بررسی بیان RNA های کوچک از جمله microRNA، بررسی کتابخانه cDNA، تحلیل نورترن بلات و تست های RCR,Real Time PCR (RT-qPCR),و همچنین کلونینگ ژن(Gene Cloning) مورد استفاده قرار می گیرد.
کاربرد ترایزول:
محلول TRIzol علاوه بر استخراج RNA، در استخراج DNA و پروتئین نیز مورد استفاده قرار میگیرد به طوری که با انجام فرایند های اضافه بر روی رسوب حاصل میتوان Protein را نیز از دئوکسی ریبونوکلئیک اسید جدا کرده و هر کدام را برای تست های دیگری مورد استفاده قرار داد
کیفیت RNA به دست آمده توسط تستهایی از جمله بررسی با نانودراپ و الکتروفورز آگارز مورد بررسی قرار میگیرد به طوری که شرایط بهینه در Nanodrop، نسبت جذب 260 نانومتر (حداکثر جذب نوکلئیک اسید) به جذب 280 نانومتر(حداکثر جذب پروتئین) 1.8-2.2 و نسبت (260/230( که جذب 230 nm مربوط به حداکثر جذب نمک می باشد بالای 1.8 می باشد
در تست electrophoresis باند های rRNA از جمله 28S rRNA، 18S rRNA و small RNA در یوکاریوت ها و 23S rRNA و 16S rRNA در پروکاریوت ها قابل مشاهده می باشد.
مزیت استفاده از این محلول نسبت به روش های دیگر مثل روش ستونی سیلیکا، به دست آمدن غلظت بالای RNA می باشد
این محلول به نور حساس بوده، فنول و نمک های موجود در آن مضر بوده و از استشمام و تماس با آن خودداری کنید و در صورت تماس با آن، ناحیه را به مدت 5 دقیقه با آب بشویید، در هنگام کار با آن از روپوش آزمایشگاه، دستکش و عینک استفاده کنید.
فاقد مهار کننده آنزیم های Reverse Transcriptase، Poly(A) Polymerase و Taq Polymerase
دیدگاه کاربران
افزودن نظر جدید