صفحه اصلی
فروشگاه
درباره ما
Description
معرفی محصول:
آنزیم HyperTherm SynFusion Reverse Transcriptase نسل جدیدی از آنزیم های رونوشت بردار معکوس (RT) است که توسط تیم تحقیق و توسعه شرکت راتین ژن مهندسی شده که با پایداری حرارتی بالا( تا 65 درجه) و غیرفعال کردن فعالیت RNase H امکان سنتز دقیق، کامل با بازده بالا از انواع RNA را فرام میکند
ویژگی های کلیدی:
پایداری دمایی فوق العاده:
با افزودن دو قطعه پروتئینی به دو سر N terminal و C terminal، پایداری حرارتی و عملکرد بهینه آنزیم در دمای 45-65 درجه سانتی گراد شده که موجب باز شدن ساختار های ثانویه پیچیده در RNA و افزایش دقت Priming می شود
غیر فعال شدن RNase H:
با ایجاد جهش های نقطه ای در جایگاه فعال این دومن از آنزیم، فعالیت نوکلئازی آن کاهش یافته در نتیجه موجب حفظ یکپارچی در سنتز cDNA و افزایش طول سنتز تا 13Kb شده است
فرایند پذیری و دقت بالا:
عملکر موثر حتی با مقادیر بسیار کم RNA (تا 1 پیکوگرم) با سنتز cDNA با طول کامل و صحت بالا
مقایسه فعالیت :
| Enzyme | Temp (°C) | Ct |
|---|---|---|
| Invitrogen SuperScript IV Reverse Transcriptase | 45 | 24.37 |
| 48 | 24.21 | |
| 50 | 24.53 | |
| 53 | 24.73 | |
| 55 | 24.44 | |
| 60 | 25.12 | |
| 63 | 25.53 | |
| 65 | 26.18 | |
| HyperTherm SynFusion Reverse Transcriptase | 45 | 24.17 |
| 48 | 24.53 | |
| 50 | 24.37 | |
| 53 | 24.84 | |
| 55 | 24.01 | |
| 60 | 24.76 | |
| 63 | 25.64 | |
| 65 | 26.23 |
آنزیم RT چیست؟
انواع آنزیم RT و شکل‌های مهندسی شده
دومین‌ها (Domains) و نقش بخش RNase H
آنزیم RT معمولاً دو دومین اصلی دارد:
اهمیت غیرفعال کردن RNase H و جهش‌های مربوط
جهش‌های افزایش‌دهنده پایداری حرارتی
مزایای پایداری حرارتی بالا
مزیت آنزیمTechnogene HyperTherm SynFusion Reverse Transcriptase
این آنزیم با اضافه کردن دو توالی به دو سر آنزیم و ایجاد point mutation در نواحی کلیدی، پایداری دمایی آنزیم را بالا برده درنتیجه بررسی بیان ژنهایی که به علت ساختار ثانویه rna در دسترس آنزیم قرار نمیگیرند و موجب عدم شرکت آنها در واکنش شده و درنتیجه موجب افزایش Ct در RT-qPCR می شود را امکان پذیر میسازد( در بسیاری از تست های بررسی بیان ژن، بالا بودن Ct به همین علت میباشد نه پایین بودن بیان ژن مربوطه در سلول هدف!!!)
با پایین آوردن فعالیت و یا غیر فعال کردن بخش RNase H رشته RNA بلند به صورت یکپارچه و کامل به cDNA تبدیل می شود در نتیجه درصورتی که پرایمر های PCR در اگزون های اولیه(نزدیک به سر 5′) طراحی شده باشند و از آنجایی که سنتز از انتهای 3′ (دم poly A) شروع شده و به سر 5′ میرسد، در نتیجه اگزون های اولیه نیز به طور کامل به cDNA رونویسی شده و در نهایت در واکنش PCR شرکت خواهند کرد( در موارد زیادی، بالا بودن Ct در ریل تایم PCR بررسی بیان ژن، عدم امکان طراحی پرایمر در اگزون های نزدیک به سر 3′ بوده در نتیجه به اجبار باید پرایمر را در اگزون های اول طراحی کنیم، حال اگر آنزیم RT به صورت یکپارچه سنتز رو انجام نداده باشه، اگزون های اول به cDNA تبدیل نشده در نتیجه در واکنش PCR شرکت نخواهند کرد در نهایت به اشتباه بیان ژن پایین گزارش میشود!!!)
با این محصول، دقت کارتون بالاس.
قیمت آنزیم RT:
تولید داخل، ضمن دارا بودن کیفیت و کارایی بالا، قیمتی بسیار مقرون به صرفه را در پی دارد.
خرید آنزیم RT:
جهت کسب اطلاعات، خرید و پشتیبانی محصول، با شماره های موجود در سایت با ما در ارتباط باشید.
دیدگاه کاربران
افزودن نظر جدید